在生物指示劑驗證試驗中，需確定孢子在實際滅菌條件下的D值，并測定孢子的純度和數量。驗證時，生物指示劑的微生物用量應比日常檢出的微生物污染量大，耐受性強，以保證滅菌程序有更大的安全性。在較終滅菌法中，生物指示劑應放在滅菌柜的不同部位。并避免指示劑直接接觸到被滅菌物品。生物指示劑按設定的條件滅菌后取出，分別置培養基中培養，確定生物指示劑中的孢子是否被*殺滅。
 

　　生物指示劑的使用秘籍：
 

　　1.將生物指示劑放入盒式滅菌器的滅菌盒中。請注意，為防止水進入生物指示劑，應將生物指示劑放在滅菌箱的網板上。
 

　　2.根據國家規定，生物學指標應放在滅菌箱的不同位置。對于SciCan盒式滅菌器，只要靠近排氣孔的位置可以通過生物監控，其他位置就可以通過。因此，我們建議將生物指示劑放在滅菌盒底部的中間。
 

　　3.執行滅菌循環以完成滅菌操作并取出生物指示劑。請注意，對于SciCan盒式滅菌器，通常不包裝生物指示劑，并選擇無包裝的周期。如果包裝了生物指示劑，則應選擇包裝周期。
 

　　4.擠壓容納的安瓿瓶，并將其與對照管一起放入56±2℃的培養箱中。取出生物指示劑后，讓其冷卻至少10分鐘，然后再將安瓿瓶擠入生物指示劑中，否則可能會導致安瓿瓶碎片傷人。
 

　　5. 48小時后，閱讀結果。孵育后，指示管沒有變色(紫色)，表明滅菌已通過。孵育后，指示管變色(黃色)，表明滅菌未通過，應及時找到滅菌失敗的原因。